紫外可見分光光度計(jì)是一種用于分析物質(zhì)吸收或發(fā)射紫外線和可見光譜的技術(shù)工具。它的基本組成包括光源、單色器、檢測(cè)器、顯示器以及控制電路等。
小節(jié)一:光源
紫外可見分光光度計(jì)的光源可以分為兩種:一種是鎢燈,另一種是鹵素?zé)?。這兩種光源都有其特點(diǎn)和適用場(chǎng)合,選擇合適的光源對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要。
小節(jié)二:波長(zhǎng)范圍
紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)范圍通常為200nm到780nm之間。這個(gè)波段覆蓋了大部分生物分子的吸收峰值,因此被廣泛應(yīng)用于各種生物學(xué)研究中。
小節(jié)三:用途
紫外可見分光光度計(jì)的主要用途有兩類:一是定量分析,即通過(guò)測(cè)量樣品中特定化合物的濃度來(lái)確定其含量;二是定性分析,即通過(guò)比較標(biāo)準(zhǔn)曲線上的吸光值來(lái)鑒定未知物。它還可以用于測(cè)定物質(zhì)的純度、結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)。
小節(jié)四:原理
紫外可見分光光度計(jì)的工作原理是基于朗伯-比爾定律(Lambert-Beer Law)。該定律表明,當(dāng)一定強(qiáng)度的入射光通過(guò)溶液時(shí),其透過(guò)的光強(qiáng)度會(huì)隨溶液的濃度而變化。通過(guò)調(diào)節(jié)光源和單色器,我們可以精確地調(diào)整光的強(qiáng)度,從而測(cè)量出吸光度。